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介孔材料SBA-15固定化脂肪酶的研究进展

黄卓楠

硅酸盐通报

介孔材料由于其孔道分布有序且孔径均匀等优点而在固定化酶催化领域引起人们的广泛关注.本文综述了新型介孔材料SBA-15对脂肪酶固定化的研究进展.总结了SBA-15的孔径大小、形貌及等电点等因素对脂肪酶固定化的影响.归纳了SBA-15上三种不同固定化方法的优缺点,并介绍了SBA-15固定化脂肪酶在手性拆分、酯水解、酯合成及转醇化反应等领域的应用.最后提出SBA-15固定化脂肪酶在发展过程中存在的问题以及今后的发展趋势.

关键词: SBA-15 , 脂肪酶 , 固定化 , 催化活性

新型温控离子液体介质中脂肪酶催化合成乙酸苯乙酯

单海霞 , 陆杨 , 李在均 , 李明 , 蔡燕 , 孙秀兰 , 张银志

催化学报 doi:10.3724/SP.J.1088.2010.90923

设计合成了三种同分异构离子液体1,3-二正戊基咪唑六氟磷酸盐([D(n-C_5)Im]PF_6)、1,3-二异戊基咪唑六氟磷酸盐([D(I-C_5)Im]PF_6)和1,3-二(2-甲基丁基)咪唑六氟磷酸盐([D(2-mb)Im]PF_6).以假单胞菌脂肪酶Pseudomonas cepacial催化合成乙酸苯乙酯为模型反应,分别考察了反应介质对酶行为的影响.结果发现,酶在离子液体[D(2-mb)Im]PF_6中的活性及反应性能明显高于有机溶剂正己烷.基于[D(2-mb)Im]PF_6离子液体的温控特点,提出了一种高温反应与低温分离相结合的乙酸苯乙酯合成路线.通过优化实验,得到合成乙酸苯乙酯的最佳反应条件为:30mg酶,1.0g离子液体,2%含水量,反应温度35.C,反应时间48h.此时,乙酸苯乙酯产率达92.3%.脂肪酶在[D(2-mb)Im]PF_6中的稳定性是在正己烷中的7.4倍,且重复使用10次后催化活性没有明显降低.此外,采用圆二色谱和内源荧光光谱法研究了不同介质中脂肪酶结构的变化.结果表明,脂肪酶在[D(2-mb)Im]PF_6中有较大的氨基酸残基裸露程度和良好的二级结构稳定性.

关键词: 温控离子液体 , 脂肪酶 , 乙酸苯乙酯 , 1,3-二(2-甲基丁基)咪唑六氟磷酸盐

P(GMA-co-HEMA)/SiO2大孔复合材料的制备及其在固定化脂肪酶中的应用

李云 , 刘晓贞 , 梁云霄

复合材料学报 doi:10.13801/j.cnki.fhclxb.20150723.002

以块体SiO2大孔材料为基质,甲基丙烯酸缩水甘油酯(GMA)和甲基丙烯酸羟乙酯(HEMA)为功能单体,通过原位聚合和溶剂蒸发制备P(GMA-co-H EMA) /SiO2大孔复合材料,用SEM、EDS、BET、FTIR和TG-DTA对样品进行表征,并将其用于固定褶皱假丝酵母脂肪酶(CRL).结果表明:SiO2大孔材料很强的毛细管作用使共聚物均匀地涂敷在其孔壁上,形成P(GMA-co-HEMA)/SiO2复合纳米薄膜.共聚物的负载量和亲疏水性可分别通过改变单体浓度和体积比进行调控,当单体体积浓度为10%、GMA和HEMA的体积比为9∶1时大孔复合材料固定化脂肪酶比酶活达到最高,为3 886.9 U/g,与底物反应重复操作8批次后剩余酶活率为68.7%.

关键词: SiO2大孔材料 , 原位聚合 , 大孔复合材料纳米薄膜 , 固定化 , 脂肪酶

乳化体系中脂肪酶催化合成环十五内酯

沈芳 , 刘雄民 , 赖芳

应用化学 doi:10.3724/SP.J.1095.2010.90240

对筛选的假丝酵母菌株Candida.sp. GXU08所产脂肪酶催化15-羟基十五烷酸甲酯合成环十五内酯进行了研究,使用超声震荡将脂肪酶酶液分散到环己烷中,以此形成水/有机溶剂乳化体系,考察了不同因素对环十五内酯产量的影响.实验结果表明,在水/环己烷乳化体系中,脂肪酶催化15-羟基十五烷酸甲酯合成环十五内酯的最适条件为:在40 ℃、180 r/min的条件下,1 g脂肪酶(pH=7.0)催化8 mmol/L的15-羟基十五烷酸甲酯反应72 h,单位酶活生成环十五内酯的最大质量为47.77×10~(-3) mg,是在纯有机溶剂环己烷中单位酶活生成环十五内酯最大质量14.54×10~(-3) mg的3.285倍.反应后的脂肪酶重复使用1次能大大提高环十五内酯的生成量.直接使用一定浓度的酶液代替酶粉催化合成环十五内酯具有转化率高、省时、节能等优点.

关键词: 乳化体系 , 超声波 , 脂肪酶 , 环十五内酯

有机-无机杂化介孔材料包埋南极假丝酵母脂肪酶的研究

顾昊 , 王慧亨 , 邓玉林 , 戴荣继

材料导报

以四甲氧基硅烷(TMOS)和一定比例的甲基三甲氧基硅烷(MTMS)、二甲基二甲氧基硅烷(DMDMS)、三甲基甲氧基硅烷(TMMS)为硅源,采用酸催化的溶胶-凝胶法包埋南极假丝酵母脂肪酶.比较了有机-无机杂化介孔材料和纯硅基介孔材料固定化南极假丝酵母脂肪酶的酶活力和保留活力,同时还比较了有机-无机杂化介孔材料固定化南极假丝酵母脂肪酶和游离南极假丝酵母脂肪酶的pH、温度以及储存稳定性.结果表明,有机-无机杂化介孔材料固定化南极假丝酵母脂肪酶具有比纯硅基介孔材料固定化南极假丝酵母脂肪酶更高的酶活力和保留活力.其中三取代的有机-无机杂化介孔材料固定化南极假丝酵母脂肪酶的酶活力最高,其保留活力可达到84.9%.此外与游离的南极假丝酵母脂肪酶相比,有机-无机杂化介孔材料固定化南极假丝酵母脂肪酶具有更好的pH、温度和储存稳定性,以及更宽的pH值和温度的酶活力范围.

关键词: 脂肪酶 , 有机-无机杂化 , 包埋

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